Капсид вируса гепатита В (HBV, ВГВ) содержит коровый антиген (HBcAg, Hepatitis B core Antigen) и покрыт суперкапсидом — липидной мембраной с молекулами поверхностного антигена (HBsAg, Hepatitis B surface Antigen). Мутации в гене S, который кодирует HBsAg, — один из факторов, способствующих оккультной (латентной, или «молчащей») инфекции HBV.
Группа китайских исследователей проверила, как влияют мутации в гене S на выявление HBsAg (этот анализ важен для диагностики, в том числе во время инкубационного периода). Были исследованы девять типичных мутаций в пределах основной гидрофильной области белка: шесть от пациента с оккультной инфекцией и гепатоцеллюлярной карциномой, три от трех доноров крови, также с оккультной инфекцией.
Были сконструированы рекомбинатные плазмиды для каждой мутации и произведена трансфекция этих плазмид в клеточные линии HepG2 и Huh7. Для изучения экспрессии HBsAg и антигенности использовали электрохимическую люминесценцию, иммуноферментный анализ (ELISA), вестерн-блоттинг и конфокальную иммунофлюоресценцию.
По сравнению с линией дикого типа уровни HBsAg в супернатанте, а также внутриклеточные уровни при всех мутациях были уменьшены на 56,39—99,09% и 42,76—99,77% соответственно (количественный анализ Elecsys от Roche). Конфокальная иммунофлуоресценция показала, что относительная интенсивность сигнала для девяти мутантов снизилась на 11,87—76,27% по сравнению с штаммом дикого типа. Сходные результаты были получены с использованием сэндвич-ELISA..
Снижение антигенности — основная причина плохой обнаруживаемости мутантного HBsAg, дополнительную роль могло сыграть снижение экспрессии HBsAg при некоторых мутациях и уменьшение концентрации антител к нему в образцах.
Источник
Kai Zhang et al. // Antigenicity reduction contributes mostly to poor detectability of HBsAg by hepatitis B virus (HBV) S-gene mutants isolated from individuals with occult HBV infection. // Journal of Medical Virology. Volume 90, Issue 2 February 2018, Pages 263–270, DOI: 10.1002/jmv.24936
Показать все 0 комментария