Новые технологии в ПЦР-анализе

Количественная детекция CMV

Предлагаем внедрение в лабораторную службу новейшей технологии — детекция возбудителей инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (Real Time PCR).

Принципиальной особенностью данного метода в отличие от классической ПЦР является возможность количественного определения ДНК/РНК инфекционных агентов в исследуемом материале, отсутствие стадии электрофореза, менее строгие требования к организации ПЦР-лаборатории и автоматическая регистрация и интерпретация полученных результатов.

Отсутствие стадии электрофореза позволяет минимизировать риск контаминации продуктами ПЦР и таким образом резко уменьшить число ложноположительных результатов. Поскольку регистрация результатов проводится непосредственно в процессе ПЦР, весь анализ можно проводить в одной-двух комнатах лаборатории и нет необходимости в отдельном помещении для детекции продуктов реакции.

Данная методика в течение последних пяти лет успешно применяется в крупнейших диагностических и научно-исследовательских центрах развитых стран мира и в ближайшее время станет широко распространенной, как и ПЦР в ее классическом варианте, благодаря экономии производственных площадей, уменьшения количества персонала и востребованности количественного определения ДНК/РНК.

Современные модели амплификаторов для проведения ПЦР в реальном времени позволяют проводить одновременную детекцию до четырех инфекционных агентов в одной пробирке («мультиплексная ПЦР»), что позволяет быстро получить результат с минимальными затратами. Одновременно возможно исследование до 96-ти биопроб. Полученные с помощью таких приборов результаты отличаются высокой точностью и воспроизводимостью. Как правило такие приборы имеют удобное управление, не требующее специальных знаний, освоить которое может даже не специалист в течение краткосрочного курса усовершенствования. В комплекте с прибором поставляется пакет прикладного программного обеспечения, позволяющий получать данные в электронном формате.


Тест-системы для ПЦР в реальном времени (Real Time PCR)

В настоящее время сотрудниками научно-производственной лаборатории Федерального научно-методического центра по профилактике и борьбе со СПИД ЦНИИ эпидемиологии МЗ РФ разработан ряд новейших тест-систем на основе метода ПЦР в реальном времени (Real Time PCR) для детекции:
 Chlamydia trachomatis;
 Mycoplasma hominis;
 Ureaplasma urealyticum;
 Neisseria gonorhoeae;
 Gardnerella vaginalis;
 Trichomonas vaginalis;
 Herpes simplex virus I/II;
 Candida albicans.

Компьютерная программа обработки результатов амплификаци

Для работы с этими тест-системами предусмотрена разработанная в ЦНИИ Эпидемиологии компьютерная программа обработки результатов амплификации. Она позволяет проводить интерпретацию полученных данных в автоматическом режиме и полностью исключить субъективизм при анализе результатов. Удобный, интуитивно понятный графический интерфейс значительно облегчает работу лаборанту, а возможность вносить в программу номера клинических проб делает процесс документации и архивации результатов чрезвычайно простым и удобным.

Также в настоящее время ведется работа по созданию тест-систем для количественного определения ДНК/РНК вирусов гепатита В, С, HIV, Суtomegalovirus, HIV.

Использование данных тест-систем позволяет в отличие от классической ПЦР проводить количественное определение ДНК/РНК инфекционных агентов в исследуемом материале, автоматическую регистрацию и интерпретацию полученных результатов, исключить стадию электрофореза.

Отсутствие стадии элетрофореза позволяет минимизировать риск контаминации продуктами ПЦР и таким образом резко снизить риск ложноположительных результатов, а также позволяет отказаться от помещения детекции, что позволяет проводить исследование в одном-двух помещениях.

Использование мультиплексной ПЦР в реальном времени позволяет одновременно проводить детекцию до четырех инфекционных агентов в одной пробирке и быстро получать результаты с минимальными затратами. В течение 1,5-2 часов Вы можете исследовать 96 проб на 4 возбудителя каждую, что превышает производительность обычных приборов почти на порядок.

Для освоения методики ПЦР в реальном времени необходимо будет пройти цикл усовершенствования на базе Центрального НИИ эпидемиологии:
 для врачей-лаборантов, незнакомых с основами ПЦР, в течение 10-ти дней;
 для врачей-лаборантов, имеющих опыт практической работы в ПЦР-лаборатории, в течении 5-ти дней.


Контактные телефоны: (495) 105-05-54, факс 916-18-18, e-mail: amplisens@pcr.ru

Контактные лица: Нагубнова Лидия Алексеевна.